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如何解決細胞培養(yǎng)瓶細胞成團問題有哪幾種方式

點擊次數(shù):1545 更新時間:2022-03-28
  細胞培養(yǎng)瓶主要用于簡化大規(guī)模細胞培養(yǎng)的過程,培養(yǎng)瓶的設計能夠簡化您的工作流程,減少工作步驟以及降低污染風險。可以使用移液管移去、補充培養(yǎng)基并且收獲細胞,設計有混合區(qū)可實現(xiàn)在容器內的液體混合,因此可以將細胞懸液、轉染或者其他試劑直接加入到培養(yǎng)瓶中進行混合。同時,混合區(qū)可確保培養(yǎng)基和細胞在各層的均勻分布,從而保證細胞生長的均勻一致。
 
  細胞培養(yǎng)瓶中平均分布的培養(yǎng)基、Nunclon表面處理技術和有效的氣體交換共同為細胞提供了一個最佳的培養(yǎng)環(huán)境,從而為細胞的高產(chǎn)量和細胞同源性提供保障。在細胞培養(yǎng)中,細胞成活率和活性都有顯著提高。培養(yǎng)瓶裝液體積比例提高,單位體積表達量的增加??梢源罅抗?jié)省培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)基的消耗,具有高重復性,不同批可擴展性次細胞生長以及產(chǎn)量具有很高的一致性。
 
  首先,細胞成團并不一定都會影響細胞培養(yǎng)進程。如果細胞輪廓清晰胞體通透,呈串狀均勻聚集,證明細胞的生長狀態(tài)良好。但多數(shù)情況下,聚團的細胞都是輪廓模糊、透光性差,甚至會出現(xiàn)合胞體,伴有細胞碎片,這證明細胞已經(jīng)衰老或產(chǎn)生病變,狀態(tài)不佳。解決細胞成團問題可以通過以下幾種方式:
 
  1、如果細胞抱團不影響生長就沒問題,只是計數(shù)時較麻煩。在消化時,可在細胞由多角形變成圓型之前,用手輕磕細胞培養(yǎng)瓶的側壁,使細胞從壁上脫落(最好不要吹打,對細胞形狀和生長都不好)。
 
  2、如果感覺有死細胞的DNA,在細胞懸液中加入幾滴無菌的DNAse(1mg/ml溶于水)將DNA鏈打斷。輕柔地吹打細胞,防止對細胞膜造成物理損傷。
 
  3、如果細胞抱團是肉眼可見的,可讓細胞靜置半分鐘左右,然后吸取上半部分沒有抱團的細胞懸液來傳代。如果細胞抱團肉眼不可見,目前還沒有特別好的分離方法,只能等細胞狀態(tài)改善后將這部分細胞慢慢排除出去。
 
  細胞培養(yǎng)瓶內的細胞出現(xiàn)抱團現(xiàn)象,可以按照以上方法進行處理,在細胞培養(yǎng)過程中需要及時觀察細胞的生長狀態(tài),并針對所出現(xiàn)的情況做出相應的調整。
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